From fbc325df1e522ddd44499e1eca66894171155e30 Mon Sep 17 00:00:00 2001
From: Leandro Ishi <leandro.ishi.lima@gmail.com>
Date: Tue, 11 Jul 2023 15:22:27 +0100
Subject: [PATCH 1/6] Instead of ignoring Ns in the MSA, we now replace N with
 the consensus

of each column. If the whole column is N and/or gaps, we replace it by a random base, with the seed initialised with the alignment sequences, i.e. this replacement is reproducible if the same alignment is given.
---
 .gitignore                                    |   1 +
 make_prg/utils/io_utils.py                    |  31 +++++--
 make_prg/utils/seq_utils.py                   |  43 +++++++++
 .../contains_n/contains_n.update_DS.zip       | Bin 1637 -> 1637 bytes
 .../contains_n_and_RYKMSW.update_DS.zip       | Bin 1670 -> 1670 bytes
 .../contains_n_no_variants.update_DS.zip      | Bin 959 -> 959 bytes
 tests/utils/test_io_utils.py                  |  86 ++++++++++++++++--
 tests/utils/test_seq_utils.py                 |  28 ++++++
 8 files changed, 174 insertions(+), 15 deletions(-)

diff --git a/.gitignore b/.gitignore
index b68bf7e..797a039 100644
--- a/.gitignore
+++ b/.gitignore
@@ -122,3 +122,4 @@ tests/data/prg_builder/write_prg/sample.bin
 tests/data/prg_builder/write_prg/sample.prg.fa
 tests/integration_tests/data/output/
 tests/integration_tests/data/output_update/
+debugging
\ No newline at end of file
diff --git a/make_prg/utils/io_utils.py b/make_prg/utils/io_utils.py
index c594d4c..3003d10 100644
--- a/make_prg/utils/io_utils.py
+++ b/make_prg/utils/io_utils.py
@@ -6,21 +6,38 @@
 from zipfile import ZipFile
 
 from Bio import AlignIO
+from Bio.Seq import Seq
 
 from make_prg import MSA
+from io import StringIO
 from make_prg.subcommands.output_type import OutputType
+from make_prg.utils.seq_utils import get_majority_consensus_from_MSA
 
 
-def load_alignment_file(msa_file: Union[str, Path], alignment_format: str) -> MSA:
-    msa_file = str(msa_file)
-    if msa_file.endswith(".gz"):
-        handle = gzip.open(msa_file, "rt")
-        alignment = AlignIO.read(handle, alignment_format)
-        handle.close()
-    else:
+def load_alignment_file(msa_file: Union[str, Path, StringIO], alignment_format: str) -> MSA:
+    if isinstance(msa_file, StringIO):
         alignment = AlignIO.read(msa_file, alignment_format)
+    else:
+        msa_file = str(msa_file)
+        if msa_file.endswith(".gz"):
+            with gzip.open(msa_file, "rt") as handle:
+                alignment = AlignIO.read(handle, alignment_format)
+        else:
+            with open(msa_file, "r") as handle:
+                alignment = AlignIO.read(handle, alignment_format)
+
+    # upper case seqs
     for record in alignment:
         record.seq = record.seq.upper()
+
+    # Compute the consensus sequence
+    consensus = get_majority_consensus_from_MSA(alignment)
+
+    # Replace 'N' with the consensus sequence in each record
+    for record in alignment:
+        record.seq = Seq("".join(
+            [consensus[i] if nucleotide == 'N' else nucleotide for i, nucleotide in enumerate(str(record.seq))]))
+
     return alignment
 
 
diff --git a/make_prg/utils/seq_utils.py b/make_prg/utils/seq_utils.py
index 1c4c732..542228e 100644
--- a/make_prg/utils/seq_utils.py
+++ b/make_prg/utils/seq_utils.py
@@ -5,6 +5,9 @@
 import numpy as np
 from Bio import pairwise2
 from Bio.Seq import Seq
+from collections import Counter
+import random
+import hashlib
 
 from make_prg import MSA
 
@@ -234,3 +237,43 @@ def get_consensus_from_MSA(alignment: MSA) -> str:
             consensus_string_as_list.append(column.pop())
     consensus_string = "".join(consensus_string_as_list)
     return consensus_string
+
+
+def get_majority_consensus_from_MSA(alignment: MSA) -> str:
+    """
+    Produces a consensus string just based on the major base for each column.
+    Note: alignment needs to be upper-cased bases
+    """
+    all_seqs = "".join(get_alignment_seqs(alignment))
+    random_seed_for_this_alignment = hashlib.sha256(all_seqs.encode()).digest()
+    random.seed(random_seed_for_this_alignment)
+
+
+    # Initialize the consensus sequence as an empty string
+    consensus = ''
+
+    # Loop over the positions in the alignment
+    for i in range(alignment.get_alignment_length()):
+        # Count the residues at this position, ignoring gaps
+        pos_counts = Counter(record.seq[i] for record in alignment if record.seq[i] != '-')
+
+        # If there are no residues other than gaps at this position, use a random base
+        if len(pos_counts) == 0:
+            consensus += random.choice("ACGT")
+            continue
+
+        # Find the residue with the highest count
+        max_residue, max_count = pos_counts.most_common(1)[0]
+
+        # If the residue is 'N', use the second most common residue
+        if max_residue == 'N':
+            max_residue = pos_counts.most_common(2)[1][0] if len(pos_counts) > 1 else 'N'
+
+        # If the residue is still 'N', randomise it
+        if max_residue == 'N':
+            max_residue = random.choice("ACGT")
+
+        # Add the residue to the consensus sequence
+        consensus += max_residue
+
+    return consensus
diff --git a/tests/integration_tests/data/truth_output/contains_n/contains_n.update_DS.zip b/tests/integration_tests/data/truth_output/contains_n/contains_n.update_DS.zip
index 24c8b7d0470d610e2752d7ac80601713137bcb40..1e0c23a9f7223303e6b4632098cb2d3aaec61a00 100644
GIT binary patch
delta 54
zcmaFL^OQ#@z?+#xgaHJ;6~7J(T%FjmQ7D{=(Rp(g69*%ZDrVlm!~v6<tj%Tx0Kx|m
AZU6uP

delta 54
zcmaFL^OQ#@z?+#xgaHIRH&ljhx%O9Jqfj^#qu=H%CJsg*Rm{ABi327zS)0uY0JfD8
ADgXcg

diff --git a/tests/integration_tests/data/truth_output/contains_n_and_RYKMSW/contains_n_and_RYKMSW.update_DS.zip b/tests/integration_tests/data/truth_output/contains_n_and_RYKMSW/contains_n_and_RYKMSW.update_DS.zip
index 97f691dd270cee4fe1f96d0919a1f64ddbb479cb..b50b2ac0deb799a690956e78beb6506e7a8035bf 100644
GIT binary patch
delta 61
zcmZqUZQ~UR@MdNaVE}<|#jnF&y<^wiD71}{(Q)%h#%x9wM`!oQ$@Z)|n^TytGI79E
JOm<{*1pqfP6hi<2

delta 61
zcmZqUZQ~UR@MdNaVE_To4V9rH9lDP<3T<O#^xJ%rF`JRa&)Ge4vOTNL<`m|uOdK#3
IlO5Sy0r5By*8l(j

diff --git a/tests/integration_tests/data/truth_output/contains_n_no_variants/contains_n_no_variants.update_DS.zip b/tests/integration_tests/data/truth_output/contains_n_no_variants/contains_n_no_variants.update_DS.zip
index bcbb2a11f2126fef2cc9a78ca40bddc4380d9ebb..ef542c32356290264fa2624da2c09fb3e4930cf1 100644
GIT binary patch
delta 67
zcmdnbzMow>z?+#xgaHJ;6~7K+YCoxC$jrb1!eWyrFiUPU31Q-Nb`NoP4+(L0o;;E1
M0S8Ro<Vt2Y08FA2tN;K2

delta 67
zcmdnbzMow>z?+#xgaHIRH&ljBu@gIM$jrb1!eWyrFiUPU31Q;&a}RO%3kmV_n>>-}
M0S8Ro<Vt2Y03;<6d;kCd

diff --git a/tests/utils/test_io_utils.py b/tests/utils/test_io_utils.py
index 5d97a67..96428a9 100644
--- a/tests/utils/test_io_utils.py
+++ b/tests/utils/test_io_utils.py
@@ -8,33 +8,103 @@
     zip_set_of_files,
 )
 from make_prg.utils.misc import equal_msas
+from make_prg.utils.seq_utils import get_majority_consensus_from_MSA
 from tests.test_helpers import are_zip_files_equal, make_alignment
+from Bio import AlignIO
+from Bio.Align import MultipleSeqAlignment
+from io import StringIO
+
 
 workdir = Path("tests/data/utils/io_utils/")
 
 
 class Test_load_alignment_file(TestCase):
-    def test___load_alignment_file___load_fasta(self):
-        expected = make_alignment(
+    def setUp(self):
+        # Define a couple of MSAs for testing purposes
+        self.msa1 = make_alignment(
+            ["ATGCN", "ATGCG", "ATGCT"],
+            ["seq1", "seq2", "seq3"],
+        )
+        self.sample_msa = make_alignment(
             ["ACGT", "ACGT", "A--C", "A--G", "C---"],
             ["seq1", "seq2", "seq3", "seq4", "seq5"],
         )
+
+    def test___load_alignment_file___load_fasta(self):
         actual = load_alignment_file(
             workdir / "load_alignment_file/sample_msa.fa", "fasta"
         )
 
-        self.assertTrue(equal_msas(expected, actual))
+        self.assertTrue(equal_msas(self.sample_msa, actual))
 
     def test___load_alignment_file___load_fasta_gz(self):
-        expected = make_alignment(
-            ["ACGT", "ACGT", "A--C", "A--G", "C---"],
-            ["seq1", "seq2", "seq3", "seq4", "seq5"],
-        )
         actual = load_alignment_file(
             workdir / "load_alignment_file/sample_msa.fa.gz", "fasta"
         )
 
-        self.assertTrue(equal_msas(expected, actual))
+        self.assertTrue(equal_msas(self.sample_msa, actual))
+
+    def test___load_alignment_file___alignment_with_N(self):
+        # Convert the MSA to a string in FASTA format
+        msa_string = StringIO()
+        AlignIO.write(self.msa1, msa_string, 'fasta')
+        msa_string.seek(0)
+
+        # Load the alignment
+        alignment = load_alignment_file(msa_string, 'fasta')
+
+        # Check the type of the returned object
+        self.assertIsInstance(alignment, MultipleSeqAlignment)
+
+        # Check that the sequences are upper case
+        for record in alignment:
+            self.assertEqual(record.seq, record.seq.upper())
+
+        # Check that 'N' has been replaced by the consensus
+        consensus = get_majority_consensus_from_MSA(alignment)
+        for record in alignment:
+            for i, nucleotide in enumerate(str(record.seq)):
+                if nucleotide == 'N':
+                    self.assertEqual(nucleotide, consensus[i])
+
+    def test___load_alignment_file___invalid_format(self):
+        # Convert the MSA to a string in a format not supported by AlignIO
+        msa_string = StringIO()
+        msa_string.write(str(self.msa1))
+        msa_string.seek(0)
+
+        # Attempt to load the alignment
+        with self.assertRaises(ValueError):
+            load_alignment_file(msa_string, 'invalid_format')
+
+    def test___load_alignment_file___file_not_exists(self):
+        with self.assertRaises(FileNotFoundError):
+            load_alignment_file('nonexistent_file.fa', 'fasta')
+
+    def test___load_alignment_file___empty_alignment(self):
+        with self.assertRaises(ValueError):
+            msa_string = StringIO()
+            AlignIO.write(MultipleSeqAlignment([]), msa_string, 'fasta')
+            msa_string.seek(0)
+            load_alignment_file(msa_string, 'fasta')
+
+    def test___load_alignment_file___all_Ns(self):
+        msa_string = StringIO()
+        AlignIO.write(make_alignment(["NNNN", "NNNN"], ["seq1", "seq2"]), msa_string, 'fasta')
+        msa_string.seek(0)
+        alignment = load_alignment_file(msa_string, 'fasta')
+        for record in alignment:
+            self.assertTrue(len(record.seq)==4 and "N" not in record.seq)
+            for char in record.seq:
+                self.assertIn(char, "ACGT")
+
+    def test___load_alignment_file___large_alignment(self):
+        msa_string = StringIO()
+        large_alignment = make_alignment(["ACGT" * 250] * 100, [f'seq{i}' for i in range(100)])
+        AlignIO.write(large_alignment, msa_string, 'fasta')
+        msa_string.seek(0)
+        alignment = load_alignment_file(msa_string, 'fasta')
+        self.assertEqual(len(alignment), 100)
 
 
 class Test_get_temp_dir_for_multiprocess(TestCase):
diff --git a/tests/utils/test_seq_utils.py b/tests/utils/test_seq_utils.py
index 893a7ab..f1d76dc 100644
--- a/tests/utils/test_seq_utils.py
+++ b/tests/utils/test_seq_utils.py
@@ -1,6 +1,7 @@
 from unittest import TestCase
 
 from make_prg.utils.misc import equal_msas
+from make_prg import MSA
 from make_prg.utils.seq_utils import (
     GAP,
     NONMATCH,
@@ -18,6 +19,7 @@
     remove_columns_full_of_gaps_from_MSA,
     remove_duplicates,
     ungap,
+    get_majority_consensus_from_MSA
 )
 from tests.test_helpers import make_alignment
 
@@ -560,3 +562,29 @@ def test___get_consensus_from_MSA___all_gap_nonmatch(self):
         actual = get_consensus_from_MSA(alignment)
 
         self.assertEqual(expected, actual)
+
+
+class TestGetMajorityConsensusFromMSA(TestCase):
+    def setUp(self):
+        # Create some sample alignments for testing
+        self.empty_alignment = MSA([])
+        self.all_N_alignment = make_alignment(["NNNN", "NNNN"], ["seq1", "seq2"])
+        self.one_N_one_base_alignment = make_alignment(["NNNN", "ACGT"], ["seq1", "seq2"])
+        self.sample_alignment = make_alignment(["ACGT", "ACGT", "A--C", "A--G", "C---"], ["seq1", "seq2", "seq3", "seq4", "seq5"])
+
+    def test___get_majority_consensus_from_MSA___empty_alignment(self):
+        consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.empty_alignment)
+        self.assertEqual(consensus, "")
+
+    def test___get_majority_consensus_from_MSA___all_Ns(self):
+        consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.all_N_alignment)
+        for char in consensus:
+            self.assertIn(char, "ACGT")  # Each character should be a random choice of A, C, G, or T
+
+    def test___get_majority_consensus_from_MSA___one_N_one_base(self):
+        consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.one_N_one_base_alignment)
+        self.assertEqual(consensus, "ACGT")  # The consensus should be the base sequence
+
+    def test___get_majority_consensus_from_MSA___sample_alignment(self):
+        consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.sample_alignment)
+        self.assertEqual(consensus, "ACGT")  # The consensus should be the most common base at each position

From 0b8380e256a1643eed343a32ab245eb13a6c3975 Mon Sep 17 00:00:00 2001
From: Leandro Ishi <leandro.ishi.lima@gmail.com>
Date: Tue, 11 Jul 2023 15:23:06 +0100
Subject: [PATCH 2/6] Adding Amira test cases

---
 .../data/amira_MSAs/alsB.fasta                | 1578 +++++++++
 .../data/amira_MSAs/glpG.fasta                |    2 +
 .../data/amira_MSAs/group_18516.fasta         | 2834 +++++++++++++++++
 .../amira_MSAs/amira_MSAs.prg.bin.zip         |  Bin 0 -> 53688 bytes
 .../truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.fa |    6 +
 .../amira_MSAs/amira_MSAs.prg.gfa.zip         |  Bin 0 -> 39783 bytes
 .../amira_MSAs/amira_MSAs.update_DS.zip       |  Bin 0 -> 18036548 bytes
 tests/integration_tests/test_from_msa.py      |   12 +
 8 files changed, 4432 insertions(+)
 create mode 100644 tests/integration_tests/data/amira_MSAs/alsB.fasta
 create mode 100644 tests/integration_tests/data/amira_MSAs/glpG.fasta
 create mode 100644 tests/integration_tests/data/amira_MSAs/group_18516.fasta
 create mode 100644 tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.bin.zip
 create mode 100644 tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.fa
 create mode 100644 tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.gfa.zip
 create mode 100644 tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.update_DS.zip

diff --git a/tests/integration_tests/data/amira_MSAs/alsB.fasta b/tests/integration_tests/data/amira_MSAs/alsB.fasta
new file mode 100644
index 0000000..1ce6494
--- /dev/null
+++ b/tests/integration_tests/data/amira_MSAs/alsB.fasta
@@ -0,0 +1,1578 @@
+>11657_5.16;1_26_18
+atgaataaatatctgaaatatttcagcggcacactcgtgggcttaatgttgtcaaccagcgcttttgctgccgccgaatatgctgtcgtattgaaaaccctctccaacccattttgggtagatatgaaaaaaggcattgaagatgaagcaaaaacactgggcgtcagcgttgatatttttgcctctccttcagaaggcgattttcaatctcaattgcagttatttgaagatctcagtaataaaaattacaaaggtatcgccttcgctccattatcctcagtgaatctggtcatgcctgtcgcccgcgcatggaaaaaaggcatttatctggttaatctcgatgaaaaaatcgacatggataatctga-aaaaagctggcggcaatgtggaagcttttgtcaccaccgataacgttgctgtcggggcgaaaggcgcgtcgttcattattgacaaattgggcgctgaaggtggtgaagtcgcaatcattgagggtaaagccggtaacgcctccggtgaagcgcgtcgtaatggtgccaccgaagccttcaaaaaagca-agccagatcaagcttgtcgccagccagcctgccgactgggaccgcattaaagcactggatgtcgccactaacgtgttgcaacgtaatccgaatattaaagcgatctattgcgcgaatgacacgatggcaatgggtgttgctcaggcagtcgcaaacgccggaa-aaacgggaaaagtgctggtcgtcggtacagatggcattccggaagcccgcaaaatggtggaagc-cggacaaatgaccgcgacggttgcccag-aacccggcggatatcggcgcaacgggtctgaagctgatggttgacgctgagaaatccggcaaggttatcccgctggataaagcaccggaatttaaactggtcgattcaatcctggtcactcaataa
+>11657_5.18;2_3_215
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zhJK&scbM1E@6-Iac@6zO&F?d>q2H(ZDf1foeVRXPUPHf6^T*6<==W*<gn149KFyyt
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zHT3&5zsS6XexK%h%xmcPX@0qR4gEgNuQsot->3QY<~8*DG(TisL%&b+qvkdA`!v7D
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z-n@o>pXM)_*U<0N{8jTB`hA+eVO~SOPxGC<dZnPD-<PZ8D~0*yHT3&5ztFsfexK%-
zn%B_p)BG~?8v1>jUuj-LzfbdP&1>lQX@0=GhJK&shs|r~_i292yoP?C<|oW+==W)U
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z`S!Q#sa!+9FIUN@@_FVp^!qfwz`TZjpXL{t*U<0Ne2;kz{XWevH?N`Jr}@?9HT3&5
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zHT3&5ztX&hexK&on%B_p)BJ#W4gEgN51ZG}@6-I4c@6zO%}<!u(C^dye)AgoeVRXL
zUPHf6^GD2U==W)U+PsE-pXN`R*U<0N{ET@G{XWf~Gq0iFr}>NKHT3&5f5p6pexK&A
zo7d3q(|pGd>8V^pzb{wGr}8fI8v1>j?>4WY->3N{<~8*DG~a7pL%&b+edaav`!wHg
zUPHf6^Bc@-==W*9VO~SOPxCv>Yv}iBe%!o<exK&|nb*+o)BKcq4gEgNA2zR{->3Ow
z<~8*DG=IXphJK&sPn*}!@6-HQ^BVenn!jLPL%&b+m(6SF_i6r`c@6zO&9^VtQ@MtI
zU#^l*<@3yI==W)Ufq4!6KFu#Ouc6<k`5yBc`hA*TZeBybPxGtIYv}iBe!Y1O{XWeP
znb*+o)BLD;4gEgN?=i2T->3P#<~8*DG=IRnhJK&s51H4{@6-HI^BVennm=w{L%&b+
zr_5{U_i6r&c@6zO&7U`~q2H(ZOXfB7`!s*myoP?C=5LtS(C^cH=MU?Zf`)!yu9B}5
z=9|~h@6-H3^BVennqO*OL%&b+%gk%&_i28mc@6zO&961Dq2H(Z0rMLAeVQLOuc6<k
z`7!ev`hA+8Ft4HCr}_QnHT3&5f6%;!exK%#nAgzn)BLn~4gEgNpER$b->3N*^BVen
znm=b=L%&b+7tL$v_i6r$c@6zO&0jaKq2H(Zj(6#)TtmMvSIMXHF7q1teVXq!uc6<k
z`6cEx^!qg5YhFXYPxF1|HT3&5-)~++zfbcU%xmcPX})1zL%&b+JIrh7_i29IyoP?C
z=J%P`(C^dylz9#PKFuFCuc6<k`D5la^!qe_!n}rlpXN`S*U<0N{8{rF`hA+eU|vJN
zPxF_}Yv}iB{+f9W{XWgN|A?N-HT3&(m3%6nXI?|UPxA}RYv}iBevx?%{XWh2nAgzn
z)BJMt8v1>jUu|APzyEfA>VfVy{TgpI-?8TIT^pOr23lhqo3C3k(Hd_pZoa;`h|?py
zckzn5SFPZGef;w6y1u^Fu4h^soA-^Z_vg_N^1uD_{Kfbo^BO{anjbZ<A>^m|J?1rp
z{4~GUyoQjU<`0<H5c1RfA@dqSewsgOUPH)F^T*9=2>EILlz9yyKh2*puOZ~8`Sa#A
zg#0vr$-IV;pXRTc*AVj4{0;LOLVlX>?9)pI4I#f=C0{bkH?JY&r}>5EHH7>$ztp^j
zke}w4nb#2V)BH;F8bW@WUu#}N$WQYF<~4-;G(T)!L&#6_W9Bu4{4_sdUPH)F^ZU(f
z2>EILpm_};Kg}O8uOZ~8`DybSLVlV*X<kFfPxCY8HH7>$f6lyyke}u+n%5BW)BF|l
z8bW@WziwVb$WQYf59_I1L&z^z$*1xz^BO{an(sERA>^m|CFV7R{50QdUPH)F^L^$u
zg#0w$Z(c*lPxBkhYY6#izF}TN$WQY-%xehwX@1<ihLE4;_nFra^3(j3c?}`|yYY>Y
ze^~C)t7vqyBlV2akw!kj+ebcGZuWned(0mBJItELMn1+2v_{51-`4iA*2sr7i~9$<
z`?q&L)B3w(8ykG=H-AL?i+{wLJJ;O#Osn~FK4RqJySmz%caKb9jU0d<S@%GD+sKpG
zIjyg!v%S3S@pAd0hq(DlxqM<5H&2(#-}ohNwv@{+*V7mN8<)?Q%j0jH)i(0Qa{1YM
z`dmHz^LqMBJv~=X|E!+=X+1q#Prp)6C+g{6)YGwgny#l`uBXq})5&`J^bn8q3*~bD
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AqyPW_

literal 0
HcmV?d00001

diff --git a/tests/integration_tests/test_from_msa.py b/tests/integration_tests/test_from_msa.py
index e121092..ce59a25 100644
--- a/tests/integration_tests/test_from_msa.py
+++ b/tests/integration_tests/test_from_msa.py
@@ -516,3 +516,15 @@ def test___sample_example(self):
                 data_dir / "output/sample_example",
             )
         )
+
+
+    def test___amira(self):
+        options = self.prepare_options("amira_MSAs")
+        options.input = str(data_dir / "amira_MSAs")
+        from_msa.run(options)
+        self.assertTrue(
+            are_dir_trees_equal(
+                data_dir / "truth_output/amira_MSAs",
+                data_dir / "output/amira_MSAs",
+            )
+        )

From dd75a6c3d2ab8f77222efd85af3340c72e51ba5f Mon Sep 17 00:00:00 2001
From: Leandro Ishi <leandro.ishi.lima@gmail.com>
Date: Tue, 11 Jul 2023 15:45:35 +0100
Subject: [PATCH 3/6] just precommit

---
 make_prg/utils/io_utils.py               | 16 +++++++---
 make_prg/utils/seq_utils.py              | 21 +++++++------
 tests/integration_tests/test_from_msa.py |  1 -
 tests/utils/test_io_utils.py             | 38 +++++++++++++-----------
 tests/utils/test_seq_utils.py            | 21 +++++++++----
 5 files changed, 60 insertions(+), 37 deletions(-)

diff --git a/make_prg/utils/io_utils.py b/make_prg/utils/io_utils.py
index 3003d10..88d6eba 100644
--- a/make_prg/utils/io_utils.py
+++ b/make_prg/utils/io_utils.py
@@ -1,6 +1,7 @@
 import gzip
 import os
 import tempfile
+from io import StringIO
 from pathlib import Path
 from typing import Dict, Union
 from zipfile import ZipFile
@@ -9,12 +10,13 @@
 from Bio.Seq import Seq
 
 from make_prg import MSA
-from io import StringIO
 from make_prg.subcommands.output_type import OutputType
 from make_prg.utils.seq_utils import get_majority_consensus_from_MSA
 
 
-def load_alignment_file(msa_file: Union[str, Path, StringIO], alignment_format: str) -> MSA:
+def load_alignment_file(
+    msa_file: Union[str, Path, StringIO], alignment_format: str
+) -> MSA:
     if isinstance(msa_file, StringIO):
         alignment = AlignIO.read(msa_file, alignment_format)
     else:
@@ -35,8 +37,14 @@ def load_alignment_file(msa_file: Union[str, Path, StringIO], alignment_format:
 
     # Replace 'N' with the consensus sequence in each record
     for record in alignment:
-        record.seq = Seq("".join(
-            [consensus[i] if nucleotide == 'N' else nucleotide for i, nucleotide in enumerate(str(record.seq))]))
+        record.seq = Seq(
+            "".join(
+                [
+                    consensus[i] if nucleotide == "N" else nucleotide
+                    for i, nucleotide in enumerate(str(record.seq))
+                ]
+            )
+        )
 
     return alignment
 
diff --git a/make_prg/utils/seq_utils.py b/make_prg/utils/seq_utils.py
index 542228e..f950adc 100644
--- a/make_prg/utils/seq_utils.py
+++ b/make_prg/utils/seq_utils.py
@@ -1,13 +1,13 @@
 import copy
+import hashlib
 import itertools
+import random
+from collections import Counter
 from typing import Generator, List, Tuple
 
 import numpy as np
 from Bio import pairwise2
 from Bio.Seq import Seq
-from collections import Counter
-import random
-import hashlib
 
 from make_prg import MSA
 
@@ -248,14 +248,15 @@ def get_majority_consensus_from_MSA(alignment: MSA) -> str:
     random_seed_for_this_alignment = hashlib.sha256(all_seqs.encode()).digest()
     random.seed(random_seed_for_this_alignment)
 
-
     # Initialize the consensus sequence as an empty string
-    consensus = ''
+    consensus = ""
 
     # Loop over the positions in the alignment
     for i in range(alignment.get_alignment_length()):
         # Count the residues at this position, ignoring gaps
-        pos_counts = Counter(record.seq[i] for record in alignment if record.seq[i] != '-')
+        pos_counts = Counter(
+            record.seq[i] for record in alignment if record.seq[i] != "-"
+        )
 
         # If there are no residues other than gaps at this position, use a random base
         if len(pos_counts) == 0:
@@ -266,11 +267,13 @@ def get_majority_consensus_from_MSA(alignment: MSA) -> str:
         max_residue, max_count = pos_counts.most_common(1)[0]
 
         # If the residue is 'N', use the second most common residue
-        if max_residue == 'N':
-            max_residue = pos_counts.most_common(2)[1][0] if len(pos_counts) > 1 else 'N'
+        if max_residue == "N":
+            max_residue = (
+                pos_counts.most_common(2)[1][0] if len(pos_counts) > 1 else "N"
+            )
 
         # If the residue is still 'N', randomise it
-        if max_residue == 'N':
+        if max_residue == "N":
             max_residue = random.choice("ACGT")
 
         # Add the residue to the consensus sequence
diff --git a/tests/integration_tests/test_from_msa.py b/tests/integration_tests/test_from_msa.py
index ce59a25..23c4980 100644
--- a/tests/integration_tests/test_from_msa.py
+++ b/tests/integration_tests/test_from_msa.py
@@ -517,7 +517,6 @@ def test___sample_example(self):
             )
         )
 
-
     def test___amira(self):
         options = self.prepare_options("amira_MSAs")
         options.input = str(data_dir / "amira_MSAs")
diff --git a/tests/utils/test_io_utils.py b/tests/utils/test_io_utils.py
index 96428a9..650e5fa 100644
--- a/tests/utils/test_io_utils.py
+++ b/tests/utils/test_io_utils.py
@@ -1,7 +1,11 @@
+from io import StringIO
 from pathlib import Path
 from unittest import TestCase
 from unittest.mock import patch
 
+from Bio import AlignIO
+from Bio.Align import MultipleSeqAlignment
+
 from make_prg.utils.io_utils import (
     get_temp_dir_for_multiprocess,
     load_alignment_file,
@@ -10,10 +14,6 @@
 from make_prg.utils.misc import equal_msas
 from make_prg.utils.seq_utils import get_majority_consensus_from_MSA
 from tests.test_helpers import are_zip_files_equal, make_alignment
-from Bio import AlignIO
-from Bio.Align import MultipleSeqAlignment
-from io import StringIO
-
 
 workdir = Path("tests/data/utils/io_utils/")
 
@@ -47,11 +47,11 @@ def test___load_alignment_file___load_fasta_gz(self):
     def test___load_alignment_file___alignment_with_N(self):
         # Convert the MSA to a string in FASTA format
         msa_string = StringIO()
-        AlignIO.write(self.msa1, msa_string, 'fasta')
+        AlignIO.write(self.msa1, msa_string, "fasta")
         msa_string.seek(0)
 
         # Load the alignment
-        alignment = load_alignment_file(msa_string, 'fasta')
+        alignment = load_alignment_file(msa_string, "fasta")
 
         # Check the type of the returned object
         self.assertIsInstance(alignment, MultipleSeqAlignment)
@@ -64,7 +64,7 @@ def test___load_alignment_file___alignment_with_N(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(alignment)
         for record in alignment:
             for i, nucleotide in enumerate(str(record.seq)):
-                if nucleotide == 'N':
+                if nucleotide == "N":
                     self.assertEqual(nucleotide, consensus[i])
 
     def test___load_alignment_file___invalid_format(self):
@@ -75,35 +75,39 @@ def test___load_alignment_file___invalid_format(self):
 
         # Attempt to load the alignment
         with self.assertRaises(ValueError):
-            load_alignment_file(msa_string, 'invalid_format')
+            load_alignment_file(msa_string, "invalid_format")
 
     def test___load_alignment_file___file_not_exists(self):
         with self.assertRaises(FileNotFoundError):
-            load_alignment_file('nonexistent_file.fa', 'fasta')
+            load_alignment_file("nonexistent_file.fa", "fasta")
 
     def test___load_alignment_file___empty_alignment(self):
         with self.assertRaises(ValueError):
             msa_string = StringIO()
-            AlignIO.write(MultipleSeqAlignment([]), msa_string, 'fasta')
+            AlignIO.write(MultipleSeqAlignment([]), msa_string, "fasta")
             msa_string.seek(0)
-            load_alignment_file(msa_string, 'fasta')
+            load_alignment_file(msa_string, "fasta")
 
     def test___load_alignment_file___all_Ns(self):
         msa_string = StringIO()
-        AlignIO.write(make_alignment(["NNNN", "NNNN"], ["seq1", "seq2"]), msa_string, 'fasta')
+        AlignIO.write(
+            make_alignment(["NNNN", "NNNN"], ["seq1", "seq2"]), msa_string, "fasta"
+        )
         msa_string.seek(0)
-        alignment = load_alignment_file(msa_string, 'fasta')
+        alignment = load_alignment_file(msa_string, "fasta")
         for record in alignment:
-            self.assertTrue(len(record.seq)==4 and "N" not in record.seq)
+            self.assertTrue(len(record.seq) == 4 and "N" not in record.seq)
             for char in record.seq:
                 self.assertIn(char, "ACGT")
 
     def test___load_alignment_file___large_alignment(self):
         msa_string = StringIO()
-        large_alignment = make_alignment(["ACGT" * 250] * 100, [f'seq{i}' for i in range(100)])
-        AlignIO.write(large_alignment, msa_string, 'fasta')
+        large_alignment = make_alignment(
+            ["ACGT" * 250] * 100, [f"seq{i}" for i in range(100)]
+        )
+        AlignIO.write(large_alignment, msa_string, "fasta")
         msa_string.seek(0)
-        alignment = load_alignment_file(msa_string, 'fasta')
+        alignment = load_alignment_file(msa_string, "fasta")
         self.assertEqual(len(alignment), 100)
 
 
diff --git a/tests/utils/test_seq_utils.py b/tests/utils/test_seq_utils.py
index f1d76dc..f4773ee 100644
--- a/tests/utils/test_seq_utils.py
+++ b/tests/utils/test_seq_utils.py
@@ -1,7 +1,7 @@
 from unittest import TestCase
 
-from make_prg.utils.misc import equal_msas
 from make_prg import MSA
+from make_prg.utils.misc import equal_msas
 from make_prg.utils.seq_utils import (
     GAP,
     NONMATCH,
@@ -11,6 +11,7 @@
     count,
     get_alignment_seqs,
     get_consensus_from_MSA,
+    get_majority_consensus_from_MSA,
     get_number_of_unique_gapped_sequences,
     get_number_of_unique_ungapped_sequences,
     has_empty_sequence,
@@ -19,7 +20,6 @@
     remove_columns_full_of_gaps_from_MSA,
     remove_duplicates,
     ungap,
-    get_majority_consensus_from_MSA
 )
 from tests.test_helpers import make_alignment
 
@@ -569,8 +569,13 @@ def setUp(self):
         # Create some sample alignments for testing
         self.empty_alignment = MSA([])
         self.all_N_alignment = make_alignment(["NNNN", "NNNN"], ["seq1", "seq2"])
-        self.one_N_one_base_alignment = make_alignment(["NNNN", "ACGT"], ["seq1", "seq2"])
-        self.sample_alignment = make_alignment(["ACGT", "ACGT", "A--C", "A--G", "C---"], ["seq1", "seq2", "seq3", "seq4", "seq5"])
+        self.one_N_one_base_alignment = make_alignment(
+            ["NNNN", "ACGT"], ["seq1", "seq2"]
+        )
+        self.sample_alignment = make_alignment(
+            ["ACGT", "ACGT", "A--C", "A--G", "C---"],
+            ["seq1", "seq2", "seq3", "seq4", "seq5"],
+        )
 
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___empty_alignment(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.empty_alignment)
@@ -579,7 +584,9 @@ def test___get_majority_consensus_from_MSA___empty_alignment(self):
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___all_Ns(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.all_N_alignment)
         for char in consensus:
-            self.assertIn(char, "ACGT")  # Each character should be a random choice of A, C, G, or T
+            self.assertIn(
+                char, "ACGT"
+            )  # Each character should be a random choice of A, C, G, or T
 
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___one_N_one_base(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.one_N_one_base_alignment)
@@ -587,4 +594,6 @@ def test___get_majority_consensus_from_MSA___one_N_one_base(self):
 
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___sample_alignment(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.sample_alignment)
-        self.assertEqual(consensus, "ACGT")  # The consensus should be the most common base at each position
+        self.assertEqual(
+            consensus, "ACGT"
+        )  # The consensus should be the most common base at each position

From ae9628ec59f17c1606a15f1dde98e47ed22ce362 Mon Sep 17 00:00:00 2001
From: Leandro Ishi <leandro.ishi.lima@gmail.com>
Date: Tue, 11 Jul 2023 16:23:08 +0100
Subject: [PATCH 4/6] Adding another test to get_majority_consensus_from_MSA()

---
 tests/utils/test_seq_utils.py | 12 ++++++++++++
 1 file changed, 12 insertions(+)

diff --git a/tests/utils/test_seq_utils.py b/tests/utils/test_seq_utils.py
index f4773ee..a88d2cf 100644
--- a/tests/utils/test_seq_utils.py
+++ b/tests/utils/test_seq_utils.py
@@ -572,6 +572,10 @@ def setUp(self):
         self.one_N_one_base_alignment = make_alignment(
             ["NNNN", "ACGT"], ["seq1", "seq2"]
         )
+        self.with_some_columns_full_of_gaps_and_Ns = make_alignment(
+            ["ANG-", "ANG-", "ANN-", "A---", "C---"],
+            ["seq1", "seq2", "seq3", "seq4", "seq5"],
+        )
         self.sample_alignment = make_alignment(
             ["ACGT", "ACGT", "A--C", "A--G", "C---"],
             ["seq1", "seq2", "seq3", "seq4", "seq5"],
@@ -592,6 +596,14 @@ def test___get_majority_consensus_from_MSA___one_N_one_base(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.one_N_one_base_alignment)
         self.assertEqual(consensus, "ACGT")  # The consensus should be the base sequence
 
+    def test___get_majority_consensus_from_MSA___with_some_columns_full_of_gaps_and_Ns(
+        self,
+    ):
+        consensus = get_majority_consensus_from_MSA(
+            self.with_some_columns_full_of_gaps_and_Ns
+        )
+        self.assertEqual(consensus, "ATGA")  # The consensus should be the base sequence
+
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___sample_alignment(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.sample_alignment)
         self.assertEqual(

From 2089324c0e2bfa68ae21a002e449b81642c560e9 Mon Sep 17 00:00:00 2001
From: Leandro Ishi <leandro.ishi.lima@gmail.com>
Date: Thu, 13 Jul 2023 15:17:55 +0100
Subject: [PATCH 5/6] Randomly select highest-count bases, do not require
 upper-cased MSA and

refactoring
---
 make_prg/utils/seq_utils.py                   |  60 ++++++++++--------
 .../amira_MSAs/amira_MSAs.prg.bin.zip         | Bin 53688 -> 53688 bytes
 .../truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.fa |   2 +-
 .../amira_MSAs/amira_MSAs.prg.gfa.zip         | Bin 39783 -> 39783 bytes
 .../amira_MSAs/amira_MSAs.update_DS.zip       | Bin 18036548 -> 18036548 bytes
 tests/utils/test_seq_utils.py                 |  27 ++++++--
 6 files changed, 56 insertions(+), 33 deletions(-)

diff --git a/make_prg/utils/seq_utils.py b/make_prg/utils/seq_utils.py
index f950adc..474a7de 100644
--- a/make_prg/utils/seq_utils.py
+++ b/make_prg/utils/seq_utils.py
@@ -239,13 +239,39 @@ def get_consensus_from_MSA(alignment: MSA) -> str:
     return consensus_string
 
 
+def convert_to_upper(sequences: Generator) -> Generator:
+    return (s.upper() for s in sequences)
+
+
+def generate_random_seed(sequences: List[str]) -> bytes:
+    return hashlib.sha256("".join(sequences).encode()).digest()
+
+
+def get_consensus_residue(position: int, sequences: List[str]) -> str:
+    # Count the residues at this position, ignoring gaps and Ns
+    pos_counts = Counter(
+        seq[position] for seq in sequences if seq[position] != GAP and seq[position] != "N"
+    )
+
+    # If there are no residues other than gaps and Ns at this position, use a random base
+    if len(pos_counts) == 0:
+        return random.choice("ACGT")
+
+    # Find the residue(s) with the highest count
+    max_count = pos_counts.most_common(1)[0][1]
+    max_residues = [res for res, count in pos_counts.items() if count == max_count]
+
+    # Randomly select a residue from the residues with the highest count
+    return random.choice(max_residues)
+
+
 def get_majority_consensus_from_MSA(alignment: MSA) -> str:
     """
-    Produces a consensus string just based on the major base for each column.
-    Note: alignment needs to be upper-cased bases
+    Produces a consensus string (composed only of ACGT) just based on the major base for each column.
     """
-    all_seqs = "".join(get_alignment_seqs(alignment))
-    random_seed_for_this_alignment = hashlib.sha256(all_seqs.encode()).digest()
+    all_seqs = get_alignment_seqs(alignment)
+    all_seqs = list(convert_to_upper(all_seqs))
+    random_seed_for_this_alignment = generate_random_seed(all_seqs)
     random.seed(random_seed_for_this_alignment)
 
     # Initialize the consensus sequence as an empty string
@@ -253,30 +279,8 @@ def get_majority_consensus_from_MSA(alignment: MSA) -> str:
 
     # Loop over the positions in the alignment
     for i in range(alignment.get_alignment_length()):
-        # Count the residues at this position, ignoring gaps
-        pos_counts = Counter(
-            record.seq[i] for record in alignment if record.seq[i] != "-"
-        )
-
-        # If there are no residues other than gaps at this position, use a random base
-        if len(pos_counts) == 0:
-            consensus += random.choice("ACGT")
-            continue
-
-        # Find the residue with the highest count
-        max_residue, max_count = pos_counts.most_common(1)[0]
-
-        # If the residue is 'N', use the second most common residue
-        if max_residue == "N":
-            max_residue = (
-                pos_counts.most_common(2)[1][0] if len(pos_counts) > 1 else "N"
-            )
-
-        # If the residue is still 'N', randomise it
-        if max_residue == "N":
-            max_residue = random.choice("ACGT")
-
         # Add the residue to the consensus sequence
-        consensus += max_residue
+        consensus += get_consensus_residue(i, all_seqs)
 
     return consensus
+
diff --git a/tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.bin.zip b/tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.bin.zip
index beb489323653fae417f2f80a8414276fb3a06a0b..2cb600a4b0c7b429af03a3abf645dda141af6b8f 100644
GIT binary patch
delta 221
zcmdn7n0d!yX5IjAW)=|!5U{LxyOCEsn%S-5?Pm38yG#xsBkcZNZSBpuN2V}MmfyiK
zd7cZ;<n_}zCLgmEm|UmLGr7JzVY2-)j>-J1IVS%-#WDH+T8_!<V>u?@-zPBHx>RKH
z`goqn_xlwlOSkh({y#xuvV9iM<oFnY$<HS?Ox~Z#F?s%c9w1hj{Em@h^7~0Zy`?}i
z=5tK8-@`HaoD$Hk1tOE<%XucBU(7Mte;vo<+lw?N|BvC>y!K=SJ2TL|lQ}LLgWNmW
O?xGdkxsw|%S^xmdu3mir

delta 225
zcmdn7n0d!yX5IjAW)=|!5U8wty^&Wunz^m=^=9>GyG#xsBTPTOvw3swkts}*{VO>p
zOCREy9KVrc^8Hed$?w=XCi^evnA~5KGTD9^$7KH19FzZ^;+Xt@Eyv{bu|PHZ1SVUT
zicDS~&olXczrtkccAm-qCumHz&jOkeBQW{-#D>ZHGdU*DpU(rt3X|V4a!h_d38)un
z_W$`DlkN9#Og^W?GkN_2k;(DpJd@8a2HLldWAg1q8k7IW@N8atGJ>5M=;p~B7mYz~
Po@{r~3hv~|4Hqo{n<`-L

diff --git a/tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.fa b/tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.fa
index bbfb5d0..3789bda 100644
--- a/tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.fa
+++ b/tests/integration_tests/data/truth_output/amira_MSAs/amira_MSAs.prg.fa
@@ -1,6 +1,6 @@
 >alsB
  5 ATGAATAAATATCT 7 G 8 A 7 AAATATTTCAGC 9 GGC 10 AGC 10 GGA 10 GAC 9 ACACTCGTGGGCTTAATGTTGT 11 C 12 T 11 AACCAGCGCTTTTGCTGCCGCCGAATATGCTGTCGTATTGAAAA 13 CC 14 CA 14 TA 13 CTCTCCAACCCATTTTGGGTAGATATGAAAAAAGGCATTGAAGAT 15 G 16 A 15 AAGCAAAAA 17 C 18 A 17 ACTGGGCGTCAGCGTTGATATTTTTGCCTC 19 T 20 G 19 CCTTCAGAA 21 G 22 C 21 GCGATTTTCAATCTCAA 6 ATGTTGTCAACCAGCGCTTTTGCTGCCGCCGAATATGC 23 C 24 T 23 GTCGTATTGAAAAC 25 A 26 C 25 CTCTCCAA 27 T 28 C 27 CCATTTTGGGTAGATATGAAAAAAGGCATTGAAGATGAAGCAAAAAC 29 GCTA 30 ACTG 29 GGCGTCAGCGTTGATATTTTTGCCTCTCCTTCAGAAGGCGATTTTCAATCTCAA 6  31 ATGAAT 32 ATGAAC 31 AAATATCTGAAATATTTCAG 33 CGGCACAC 34 TGGCACAC 34 CGGCACAT 33 TCGTGGGCTTAATGTTGTCAACCA 35 G 36 A 35 CGCTTTTGCT 37 G 38 A 37 CCGCCGAATATGC 39 C 40 A 39 GTCGTATTGAAAACACTCTCCAA 41 CCCATTT 42 TCCATTT 42 TCCATTC 41 TGGGTAGATATGAAAAAAGGCATTGAAGATGAAGCAAAAA 43 CGCTGGGCG 44 CGCTAGGCG 44 TGCTGGGCG 44 CACTGGGCG 44 CGCTGGGCA 43 TCAGCGTTGATATTTTTGCCTCTCCTTCAGAAGGCGATTTTCAATCTCAA 6  45 ATGAAAAAAG 46 TTGGGTAGATATGAAAAAG 46 TTGGGTAGATATGAAAAAA 45 GCATTGAAGATGAAGCAAAAAC 47 A 48 G 47 CTGGGCGTCAGCGTTGATATTTTTGCCTCTCCTTCAGAAGGCGATTTTCAATCTCAA 6 ATGAATAAATATCTGAAATATTTCAG 49 C 50 T 49 GGCACACTCGTGGGCTTAATGTTGTCAACCAGCGCTTTTGCTGCCGCCGAATATGC 51 C 52 T 51 GTCGTATTGAAAACACTCTCCAACCCATTTTGGGTAGATATGAAAAAAGGCATTGAAGATGAAGCAAAAATGCTGGGCGTCAGCGTTGATATTTTTGCCTCTCCTTCAGAAGG 53 TGAT 54 CGAT 54 TGAG 53 TTTCAATCTCAA 6 ATGAATAAATATCTGAAATATTTCAG 55 C 56 T 55 GGCACACTCGTGGGCTTAATGTTGTCAACCAGCGCTTTTGCT 57 G 58 A 57 CCGCCGAATATGC 59 TG 60 CA 59 TCGTATTGAAAAC 61 A 62 G 62 C 61 CTCTCCAACCCATTTTGG 63 G 64 A 63 TAGATATGAAAAAAGGCATTGAAGATGAAGCAAAAACGCTGGG 65 C 66 T 65 GTCAGCGTTGATATTTTTGCCTCTCCTTCAGAAGGCGATTTTCAATCTCAA 6  5 TTGCAGTTATTTGAAGATCTCAGTAATAAAAATTACAAAGG 67 T 68 C 67 ATCGCCTTCGC 69 T 70 G 70 A 69 CCATTATCCTCAGT 71  73 G 74 A 73 AATCTGG 75 T 76 C 75  72 GAACCTGGT 72 GAATTTGGT 72 GAACCTAGT 71 CATGCCTGT 77 CGCC 78 TGCC 78 TGCA 77 CGCGCATGGAAAAAAGG 79 C 80 T 79 ATTTATCTGGT 81 TAATCTCG 82 CAATCTCG 82 TAATCTCA 81 ATGAAAAAA 83 TC 84 GC 84 TT 83 GACATGGATAATCT 85 GAAAAAAGCTGGCGGC 86 GAAAAAAGCAGGCGGT 86 GAAAAAAGCTGGCGGT 86 GAAAAAAGCTAGCGGC 86 AAAAAAAGCTGGCGGC 86 GAAAAAAGCAGGCGGC 86 GAAAGCTGGCGGC 85 AATGTGGAAG 87 CTTTTGTCACC 88 GTTTTGTCACC 88 CTTTTGCCACC 88 GTTTTGTCACT 87 ACCGATAA 89  91 CGTTGCT 92 TGTTGCT 91  90 CGTTGCC 90 TGTTGCC 89 GTCGGGGCGAAAGG 93 CGCGTCGTTC 94 CGCGTCATTC 94 TGCGTCATTC 94 CGCGTCATTG 94 CGCATCATTC 93 ATTATTG 95 ACAAATTGGGCGCTGAAGGTGGTGAAGTCGCAATCATTGAG 96 ACAAGCTGGGTGCCGAAGGGGGTGAAGTCGCAATCATTGAG 96 ACAAGCTGGGTGCCGAAGGGGGTGAAGTTGCAATTATTGAG 96 ATAAATTGGGCGCTGAAGGTGGTGAAGTCGCAATCATTGAG 96 ACAAGCTGGGTGCCGAAGGGGGTGAAGTCGCAATCATCGAG 96 ACAAGCTGGGTGCCGAAGGGGGTGAAGTTGCAATTATTGAA 96 ACAAATTGGGTGCTGAAGGTGGTGAAGTCGCAATCATTGAG 96 ACAAATTGGGCGCTGAAGGGGGTGAAGTCGCAATCATTGAG 96 ACAAATTGGGCGCCGAAGGGGGTGAAGTCGCAATCATTGAG 96 ACAAGCTGGGTGCCGAAAGGGGTGAAGTCGCAATCATTGAG 96 ACAAGCTGGGTGCCGAAGGGGATGAAGTCGCAATCATCGAG 96 GCAAGCTGGGTGCCGAAGGGGGTGAAGTTGCAATTATTGAG 96 ATAAATTGGGTGCCGAAGGGGGTGAAGTCGCAATCATTGAG 96 ACAAATTGGGCGCTAAAGGTGGTGAAGTCGCAATCATTGAG 96 ACAAGCTGGGTGCCGAAGGGGGTAAAGTCGCAATCATTGAG 95 GGTAAAGCCGG 97 T 98 C 97 AACGCCTCCGG 99  101 TGAAGCG 102 TGAAGCA 101  100 CGAAGCA 99 CGTCGTAATGG 103 TGCCACCGAAG 104 TGCCACCGAAA 104 TGCCACCAAAG 104 CGCCACCGAAG 104 TACCACCGAAG 103 CCTTCAAAAAAGC 105 AAGCCAGATCAAGCTTGTCGCCAGCCAGCCTGCCGACTGGGACCGC 106 AAGCCAGATCAAGCTTGTCGCCAGCCAGCCTGCCGACTGGGACCGT 106 AAGCCAGATCAAGCTTGTCGCCAGCCCGCCCGCTGACTGGGACCGC 106 AAGCCAGATCAAGCTTGTCGCCAGCCAGCCCGCTGACTGGGACCGC 106 AAGCCAGATCAAGCTTGTCGCCAGCCAGCCCGCCGACTGGGACCGC 106 AAGCCAGATCAAGCTTGTCGCCAGTCAGCCTGCCGACTGGGACCGT 106 AAGCCAGATCAAGCTTGTCACCAGCCAGCCTGCCGACTGGGACCGT 106 AAGCCAGCTCAAGCTTGTCGCCAGCCAGCCTGCCGACTGGGACCGT 106 AAGCCAGATCAAGCTTGTCGCCAGCCATCCTGCCGACTGGGACCGT 106 AAGCAGATCAAGCTTGTCGCCAGCCAGCCTGCCGACTGGGACCGC 106 AAGCCAAATCAAGCTTGTCGCCAGCCAGCCTGCCGACTGGGACCGC 106 AAGCCAGATCAAGCTTGTCGCCAGCCAGCCTGCCGACTGGGATCGC 106 AAACCAGATCAAGCTTGTCGCCAGCCAGCCTGCCGACTGGGACCGC 106 AAGCCAGATCAAACTTGTCGCCAGCCAGCCCGCTGACTGGGACCGC 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diff --git a/tests/utils/test_seq_utils.py b/tests/utils/test_seq_utils.py
index a88d2cf..653219f 100644
--- a/tests/utils/test_seq_utils.py
+++ b/tests/utils/test_seq_utils.py
@@ -483,7 +483,7 @@ def test___remove_columns_full_of_gaps_from_MSA___some_gaps___two_columns_remove
 class TestSeqIteration(TestCase):
     input_seqs = ["TTAGGTTT", "TTA--TTT", "GGA-TTTT"]
 
-    def test_get_seqs_from_alignment(self):
+    def test___get_seqs_from_alignment(self):
         msa = make_alignment(self.input_seqs)
 
         expected = self.input_seqs
@@ -491,7 +491,7 @@ def test_get_seqs_from_alignment(self):
 
         self.assertEqual(expected, actual)
 
-    def test_count_alignment_seqs(self):
+    def test___count_alignment_seqs(self):
         msa = make_alignment(self.input_seqs)
 
         expected = 3
@@ -580,6 +580,14 @@ def setUp(self):
             ["ACGT", "ACGT", "A--C", "A--G", "C---"],
             ["seq1", "seq2", "seq3", "seq4", "seq5"],
         )
+        self.lower_case_sample_alignment = make_alignment(
+            ["acgt", "acgt", "a--c", "a--g", "c---"],
+            ["seq1", "seq2", "seq3", "seq4", "seq5"],
+        )
+        self.equally_likely_bases = make_alignment(
+            ["AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA", "CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC"],
+            ["seq1", "seq2"],
+        )
 
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___empty_alignment(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.empty_alignment)
@@ -590,7 +598,7 @@ def test___get_majority_consensus_from_MSA___all_Ns(self):
         for char in consensus:
             self.assertIn(
                 char, "ACGT"
-            )  # Each character should be a random choice of A, C, G, or T
+            )
 
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___one_N_one_base(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.one_N_one_base_alignment)
@@ -602,10 +610,21 @@ def test___get_majority_consensus_from_MSA___with_some_columns_full_of_gaps_and_
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(
             self.with_some_columns_full_of_gaps_and_Ns
         )
-        self.assertEqual(consensus, "ATGA")  # The consensus should be the base sequence
+        self.assertEqual(consensus, "AAGC")  # The consensus should be the base sequence
 
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___sample_alignment(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.sample_alignment)
         self.assertEqual(
             consensus, "ACGT"
         )  # The consensus should be the most common base at each position
+
+    def test___get_majority_consensus_from_MSA___lower_case_sample_alignment(self):
+        consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.lower_case_sample_alignment)
+        self.assertEqual(
+            consensus, "ACGT"
+        )  # The consensus should be the most common base at each position
+
+
+    def test___get_majority_consensus_from_MSA___equally_likely_bases(self):
+        consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.equally_likely_bases)
+        self.assertEqual(set(consensus), {'A', 'C'})  # A and C should be chosen at random

From 7454a899b331bcb011550348093bdad4722f9946 Mon Sep 17 00:00:00 2001
From: Leandro Ishi <leandro.ishi.lima@gmail.com>
Date: Thu, 13 Jul 2023 15:31:18 +0100
Subject: [PATCH 6/6] linting

---
 make_prg/utils/seq_utils.py   | 5 +++--
 tests/utils/test_seq_utils.py | 9 ++++-----
 2 files changed, 7 insertions(+), 7 deletions(-)

diff --git a/make_prg/utils/seq_utils.py b/make_prg/utils/seq_utils.py
index 474a7de..a8d0279 100644
--- a/make_prg/utils/seq_utils.py
+++ b/make_prg/utils/seq_utils.py
@@ -250,7 +250,9 @@ def generate_random_seed(sequences: List[str]) -> bytes:
 def get_consensus_residue(position: int, sequences: List[str]) -> str:
     # Count the residues at this position, ignoring gaps and Ns
     pos_counts = Counter(
-        seq[position] for seq in sequences if seq[position] != GAP and seq[position] != "N"
+        seq[position]
+        for seq in sequences
+        if seq[position] != GAP and seq[position] != "N"
     )
 
     # If there are no residues other than gaps and Ns at this position, use a random base
@@ -283,4 +285,3 @@ def get_majority_consensus_from_MSA(alignment: MSA) -> str:
         consensus += get_consensus_residue(i, all_seqs)
 
     return consensus
-
diff --git a/tests/utils/test_seq_utils.py b/tests/utils/test_seq_utils.py
index 653219f..73ecbad 100644
--- a/tests/utils/test_seq_utils.py
+++ b/tests/utils/test_seq_utils.py
@@ -596,9 +596,7 @@ def test___get_majority_consensus_from_MSA___empty_alignment(self):
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___all_Ns(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.all_N_alignment)
         for char in consensus:
-            self.assertIn(
-                char, "ACGT"
-            )
+            self.assertIn(char, "ACGT")
 
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___one_N_one_base(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.one_N_one_base_alignment)
@@ -624,7 +622,8 @@ def test___get_majority_consensus_from_MSA___lower_case_sample_alignment(self):
             consensus, "ACGT"
         )  # The consensus should be the most common base at each position
 
-
     def test___get_majority_consensus_from_MSA___equally_likely_bases(self):
         consensus = get_majority_consensus_from_MSA(self.equally_likely_bases)
-        self.assertEqual(set(consensus), {'A', 'C'})  # A and C should be chosen at random
+        self.assertEqual(
+            set(consensus), {"A", "C"}
+        )  # A and C should be chosen at random